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  • 如何研究某个gene的ceRNA 网络

    研究人员针对 PTEN 这个关键的抑癌基因,来探究调控该基因表达的ceRNA 网络;

    分析策略:

    1)预测能调控该基因的miRNAs

    通过miRanda 软件预测和实验验证相结合的方式,挑选出 miR-17-5p, miR-19a,miR-19b, miR-20a, miR-20b, miR-26a, miR-26b, miR-93, miR-106a, miR-106b 等miRNA

    2) 预测同时受这些miRNA 调控的其他基因

    通过miRanda 软件预测和实验验证相结合的方式,挑选出NCOA7, BCL11B, SERINC1, ZNF460, NUDT13,DTWD2, and VAPA 等候选基因进行后续分析;

    3) 验证共表达关系

    体内实验验证候选基因和目标基因之间的共表达关系

     

     从生物信息数据分析的角度看,只需要做两步分析;

    以上图为例:对于目标RNA X, 预测能调控该RNA X的RNA Y,当然RNA Y不会只有一个;1)第一步以miRNA 为桥梁,找到和其共享miRNA 调控的RNA Y;2) 第二步,分析RNA X 和 RNA Y 之间的共表达关系,如果是二者存在调控关系,则表达量会存在一个相关性,而且肯定是正相关关系

     分析的过程有以下几个难点:

    1) 不同类型的RNA 和 miRNA 调控关系的准确性, miradna 软件的结果肯定会存在一定的假阳性率;

    2)  共表达分析时。阈值的筛选,文章中通过皮尔森相关性检验,计算相关系数和p值,在结果过滤时,仅仅使用了pvlaue < 0.001 ,挑选了显著相关的结果,但是可以看到,挑选的结果候选基因和目标基因的表达量的相关系数都不是很高,这个阈值在分析时如何取舍,是不是说只要p值越低越好,相关系数的大小无所谓?只要在统计学上相关性显著即可?

    以上的问题都会导致预测的 ceRNA 网络存在许多的假阳性,这个是目前的分析手段不可避免的,最好的做法是结合实验手段去验证。

    参考文献:Coding-independent regulation of the tumor suppressor PTEN by competing endogenous mRNAs.Cell. 2011 Oct 14;147(2):344-57.

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