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  • 【转载】K-mer算法

    k-mer是指将reads分成包含k个碱基的字符串,一般长短为m的reads可以分成m-k+1个k-mers.举个例子吧,为了简化,有这么个reads(当然实际比这个长):AACTGACTGA.如果k-mer的k为3的话,我们可以将其切割为AAC ACT CTG TGA GAC ACT CTG TGA.我们将这些k-mers放入计算机中拼接,假设第一个为TGA ,那么下一个应该为GA-,.……

        TGA

          GAC

            ACT

              CTG

               TG ????

    基于这样的思路,我们很快就发现了问题,下一个点可能有很多的选择,或者没有选择

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

    我们需要找到Hamiltonian path,我们需要找到包含每个点的,但是只包含一次。下图像不像我们小学之前做过的游戏,遍历每个点,但是每个点只能经过一次。

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

    这是俄国一个我一个伟大的科学家William Hamilton的一个发明。

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

    但是又提出了一个假设,如果有两条或多条的Hamiltonian path呢?如何才能知道其中的一条是DNA的序列呢

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

    我们上面提到的是3个碱基为一个node,现在我们就只要其中的2个来作图,然后将作出的图中相同的node合并,

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

    这是两种算法思想,在Eulerian Path Problem中,visit every edge of the graph exactly once.

    而在Hamiltonian Path Problem,visit every node exactly once.第一种算法更好实现,所以我们接下来讲关于Eulerian Path Problem的de Bruijin graphs.

    在实际组装基因的时候,我们知道的是reads和k-mers,通过这个我们来基于Eulerian Path Problem来构建de Bruijin graphs,然后找Eulerian Path。可是会有很多的de Bruijin graphs,或者一个de Bruijin graphs有几个Eulerian Path。为了减少contigs,发明了read pair sequencing

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

     把很多拷贝的相同基因,尺寸随意剪切为大的相同大小InsertLength片段。产生read-pairs:两个reads来自每个片段的末尾。A paired k-mer就是两个k-mer距离相隔d,

    【T】每日一生信--序列组装的算法k-mer

     

    根据我的实际使用经验,如果你的read足够长,覆盖度足够高,kmer设的越高越好。

    但是实际情况是,测序的覆盖度经常不够,或者用早期的GA平台测出来read长度只有35bp,或者为了节省成本,在mate-pair library(长片段insert的文库,一般>2kb)测序时双端只有70bp,甚至40bp之类的,情况比较复杂。

    一般来说,我尽量使用更高的kmer,如果我有100bp的pair-end,50bp的mate-pair,而且覆盖度挺高,我就用到kmer=45左右,如果mate-pair只有40bp,kmer=35左右。如果mate-pair更短,只有35bp,kmer值就再降一点。

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