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  • 用popart构建常染色体单倍型网络(Autosomal haplotypes network construction with popart)

    1)将vcf转化为plink格式,假定输入的vcf文件名为:17893893-17898893.vcf,也可以参考链接:将vcf文件转化为plink格式并且保持phasing状态

    /vcftools --vcf 17893893-17898893.vcf --plink-tped --out 17893893-17898893 

      

    /plink --tfile 17893893-17898893 --recode --out 17893893-17898893
    

      

    2) 用PLINK确定要研究的位点是否处于连锁的状态;生成blocks和blocks.det两种后缀格式文件;

    /plink --file 17893893-17898893 --blocks no-pheno-req --out 17893893-17898893
    

      

     以上结果说明rs62033246|rs7189274|rs7187782|rs62033247|rs7194607|rs7200159|rs199711091|rs2361776|rs8054992|rs1845376|rs35902958|rs9928657|rs9928743|rs56078865|rs62033249|rs62033250|rs9936044|rs7184460|rs4781927|rs7202082|rs4780669|rs7202439|rs7195939|rs57418698|rs34615631|rs533867711|rs555603620|rs567435894|rs7499772|rs62033251|rs56248612|rs7202488|rs61671028|rs62033253|rs9928974这35个位点是连锁的

    3) 提取这35个位点作为接下来的单倍型网络构建;去掉vcf的头文件,保存为txt格式,见如下图,17893893-17898893.txt:

    4)准备17893893-17898893_singstring.txt文件,该文件其实就是去掉 0|0,0|1,1|0,1|1的“|”。

    5)接下来,生成两条单链,用R输入如下命令:

    install.packages("xlsx")
    library(xlsx)
    kg_ame<-read.table("E:/17893893-17898893.txt")
    kg_ame<-data.frame(kg_ame);
    library("stringr");
    newdata=c()
    for (i in 0:34){
      i=i+1
      kk=kg_ame[i,6:2509];
      kk[which(kk=="0|0")]=paste(kg_ame[i,4],kg_ame[i,4]);
      kk[which(kk=="0|1")]=paste(kg_ame[i,4],kg_ame[i,5]);
      kk[which(kk=="1|0")]=paste(kg_ame[i,5],kg_ame[i,4]);
      kk[which(kk=="1|1")]=paste(kg_ame[i,5],kg_ame[i,5]);
      newdata=rbind(newdata,kk)
    }
    ##6:2509指的是2000多个样本对应的碱基;
    ##0:34指的是35个碱基;这一步是将0|0,0|1,1|0,1|1转化为碱基形式,类似vcf转化为Ped的步骤;
    openxlsx::write.xlsx(newdata,file ="E:/17893893-17898893_change.xlsx")
    kk=kg_ame[1,7:15];kk
    kk[which(kk=="0|0")]=paste(kg_ame[1,4],kg_ame[1,4]);kk
    #####分为两条链,转换为ped格式;
    library(xlsx)
    kg_ame<-read.table("E:/17893893-17898893_singstring.txt")
    kg_ame<-data.frame(kg_ame);
    library("stringr");
    newdata=c()
    for (i in 0:34){
      i=i+1
      kk=kg_ame[i,6:5013];
      kk[which(kk=="0")]=kg_ame[i,4];
      kk[which(kk=="1")]=kg_ame[i,5];
      newdata=rbind(newdata,kk)
    }
    openxlsx::write.xlsx(newdata,file ="E:/17893893-17898893_changesingstring.xlsx")
    se1<-seq(from=1,to=5008,by=2);
    se2<-seq(from=2,to=5008,by=2);
    stringone<-newdata[,se1];
    stringtwo<-newdata[,se2];
    openxlsx::write.xlsx(stringone,file ="E:/17893893-17898893_changesingstringone.xlsx")
    openxlsx::write.xlsx(stringtwo,file ="E:/17893893-17898893_changesingstringtwo.xlsx")
    ####以上步骤为转为两条单链
    

      

    6) 将上述的两条单链生成fas格式;

    paste -d "
    "  17893893-17898893_changesingstringone_firstdot.txt 17893893-17898893_changesingstringone.txt > 17893893-17898893_changesingstringone_dot.fas
    paste -d "
    "  17893893-17898893_changesingstringtwo_firstdot.txt 17893893-17898893_changesingstringtwo.txt > 17893893-17898893_changesingstringtwo_dot.fas
    cat 17893893-17898893_changesingstringone_dot.fas 17893893-17898893_changesingstringtwo_dot.fas >> 17893893-17898893_changesingstring_onetwo_dot.fas #这两条链合并在一起
    
    
    

    17893893-17898893_changesingstringone_firstdot.txt 文件格式如下:

    17893893-17898893_changesingstringone.txt的文件格式如下:这个文件就是5)生成出来的其中一条单链。

    生成的fas文件如下:

    第二条链的处理同上。最后一步,就是把这两条链合并在一起

    7)用DnaSP6将fas文件生成nex文件

     

    8)统计nex文件中不同群体的haplotype的数量

    准备17893893-17898893_hap.xlsx文件

    准备allsample.txt文件

    输入如下命令:

    #####统计nex生成的所有haplotype所在的样本和群体,这里假定生成了100个haplotype
    library(dplyr)
    library(xlsx)
    model_57hanchip<-read.xlsx("E:/17893893-17898893_hap.xlsx",2)
    model_57hanchip<-data.frame(model_57hanchip)
    kg_ame<-read.table("E:/allsample.txt")
    kg_ame<-data.frame(kg_ame);
    newdata=c()
    for (i in 0:99){
      i=i+1
      HAP1<-kg_ame[,2];
      df1 <- data.frame(id = HAP1, kg_ame[,3],kg_ame[,4])
      HAP2<-model_57hanchip[,i]
      df2 <- data.frame(id = HAP2)
      k=merge(df1, df2, by = "id",all = FALSE)
      j=table(k[,3])
      newdata=rbind(newdata,j)
      print(i)
    }
    openxlsx::write.xlsx(newdata,file ="E:/17893893-17898893_hapcount.xlsx")
    

      

     

    9)修改生成的nex文件

    DnaSP6生成的nex文件并没有BEGIN TRAITS的头文件,因此这一步是需要手动修改的。

    这一步,除了圈出来的数字和AFR AMR EAS EUR SAS是需要修改,其他照抄。

     10)用popart构建单体型网络

    导入文件后,选择适合的算法,即可生成。

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